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Escuela nacional de medicina y homeopatÍa

Vol. 74; No. 638. Septiembre-octubre 2005. Editorial Propulsora de Homeopatía. EFECTO BACTERICIDA DE LAS TINTURAS; CALENDULA OFF. Y
ECHINACEA ANGUSTIFOLIA EN EL STREPTOCOCCUS MUTANS.
M. en C. Marisol Pezet Valdez, C.D. María Ernestina Moctezuma Lechuga,
M. en C. Jessica García Vivas, M. en C. José Tomás Hernández Méndez.

Como sabemos, la placa dentobacteriana (PDB) contiene diversos microorganismos que son factores predisponentes de diversas patologías bucales como la enfermedad periodontal y la caries, esta última relacionada con el aumento principalmente de uno de los tres estreptococos considerados como cariogénicos; Streptococcus mutans. Actualmente a la caries se le considerada como una desmineralización ácida, de los tejidos del diente, de origen bacteriano. La terapéutica homeopática en odontología hasta el día de hoy es terreno fértil en investigación ya que existen pocas y de estas encontramos algunas que son aplicadas en bacterias. Con respecto a la terapéutica homeopática existen diversas tinturas que inhiben algunos microorganismos, de entre ellos se eligió a Echinacea angustifolia y Caléndula officinalis debido a que sus principios activos tienen propiedades bactericidas que se han demostrado en estudios preliminares con otros microorganismos. El objetivo de este proyecto es evaluar el efecto de las tinturas madres Calendula officinallis y Echinacea angustifolia, para que inhiban el desarrollo del Streptococcus mutans. La investigación es prospectiva, experimental, comparativa y longitudinal. Se estudia “in vitro” la cepa de Streptococcus mutans G536, obtenida en medios de cultivo como son: Gelosa Sangre (GS), KF con TTC al 1% con tinturas y diluciones homeopáticas a 1:1; 1:3, 1:6; A los medios de cultivo se les agregó la tintura madre sustituyendo el agua en forma proporcional. El medio de cultivo con Caléndula officinalis mostró un mayor efecto inhibitorio que el medio de cultivo con Echinacea angustifolia, sin embargo, ambas presentaron mayor inhibición en las diluciones 1/1 y 1/3 como se ha reportado en investigaciones anteriores con Streptococcus de la Placa Dentobacteriana y tinturas homeopáticas. INTRODUCCIÓN.
La caries es una enfermedad infecciosa causada por las bacterias cariogénicas de la placa dental, que causan destrucción de los tejidos hasta la pérdida dentaria. Estas bacterias necesitan de los glúcidos para sus necesidades metabólicas que promueven un medio adecuado para su patogenisidad y su proliferación, ya que sus desechos metabólicos son ácidos. Para que se dé la acidogénesis de la placa dental, considerado mecanismo etiopatogénico de la caries, se necesitan estos dos factores: los glúcidos fermentables y las La curva de Stephan ilustra la acidogénesis de la placa dental, en donde describió, durante los años cuarenta, los cambios de pH que se producían en la superficie de los dientes tras la ingesta de glúcidos. El análisis en ayunas muestra normalmente un pH casi neutro, con predominio de acetato y cantidades menores de formiato, propionato y butirato. Después de ingerir hidratos de carbono, el pH es ácido y el lactato alcanza su máximo aproximadamente a los 15 minutos, pero a los 45 minutos, retornan las condiciones iniciales, con descenso del lactato y subida del pH. Las curvas de Stephan, que expresan el registro del pH mediante electrodos colocados en la placa, también se utilizan para valorar el potencial cariógeno de los alimentos. La sacarosa, se considera cariogénica, ya que baja el pH hasta 4 provocando un medio apropiado por la proliferación de los agentes bacterianos. Este pH ácido ataca la hidroxiapatita del esmalte, que libera calcio y produce especies más solubles como el fosfato monocálcico. El cristal del esmalte va siendo más desordenado, formándose zonas de cavitación que las bacterias colonizan. Según lo anterior, existe una clara relación entre el metabolismo de la placa y la dieta para que se produzca la caries, pero Keyes agregó que también es importante el terreno para la aparición de esta patología. Por medio de estos estudios, se ha permitido definir un pH crítico, es decir, aquel por debajo del cual se produce una desmineralización del esmalte; se sitúa entre 5.3 y 5.7. Los aportes de carbohidratos frecuentes a la cavidad oral determinan la repetición de períodos de acidez prolongada, a la que no pueden sobrevivir numerosas bacterias, sin embargo ésta acidez son favorables al crecimiento de otras bacterias (bacterias acidúricas, como los estreptococos del grupo mutans y los lactobacilos) que progresivamente se van a convertir en los elementos predominantes de la placa. La presencia de estas condiciones representa un alto riesgo cariogénico, por lo que actualmente es tan importante el recuento del estreptococo mutans y así poder determinar y prevenir si una persona es o no susceptible a la caries dental. Si el efecto buffer del medio ambiente, sobre todo de la saliva, no es capaz de moderar la caída del pH local debajo del pH crítico, el fosfato y el calcio del esmalte superficial se disuelve: se desmineraliza el esmalte. La saliva es el factor protector mas importante para mantener el equilibrio entre desminealización-remineralización ya que contiene calcio y fosfatos así como elementos de inmunidad; inmunoglobulinas, sustancias bacteriostáticas y bactericidas. Para mantener el equilibrio también llegan a participar algunas bacterias de la placa, ya que tienen un metabolismo alcalino. Sin embargo, si este equilibrio se rompe a favor de la desmineralización, hay pérdida de sustancia y aparece la caries y se puede producir por tres formas; Por una parte, la producción de ácido, tras un aporte importante o prolongado de glúcidos que excede la capacidad de los mecanismos homeostáticos de la saliva. Por otra parte, la saliva tal vez no ejerza su papel protector por existir alguna patología general o por algunas terapéuticas como la radiación en algunos cánceres. O también la formación de ácidos puede repetirse a intervalos tan próximos que los mecanismos de remineralización no pueden ser eficaces. Este es el caso más frecuente dentro de la población; la alta ingesta de azúcares refinados o de alimentos ricos en azúcar, en forma repetida. Antes de introducirse los azucares refinados dentro de nuestra dieta, sobre todo occidental, el estreptococo mutans competía junto con todos los demás microorganismos de la placa para obtener su aporte energético, aunque la caries dental existía, se presentaba únicamente en adultos y la unión esmalte- cemento. La introducción de la sacarosa en frecuencias repetidas en el régimen alimentario del hombre da ventajas al estreptococo mutans en la competencia de los elementos nutritivos, a la vez que lo convierte en una especie predominante entre las especies de fermentación láctica de la cavidad oral. Hoy entendemos mejor por que las lesiones cariosas del hombre moderno, caracterizadas por la asociación S. mutans-sacarosa, difieren en cuanto a frecuencia, gravedad y localización con nuestros antepasados. La incidencia de la caries en el hombre moderno ha aumentado de forma considerable y es proporcional a frecuencia de ingestión de productos azucarados. La caries del hombre moderno se localiza principalmente en los sitios de colonización del S. mutans; fosas y surcos de las fosas de molares y en las caras interproximales. Sin embargo, esto no quiere decir que la sacarosa sea la única responsable, también otros azucares favorecen la producción de la caries. Esto no quiere decir tampoco que S. mutans sea la única bacteria causal en la etiología de la caries, otras bacterias tienen también poder cariogénico, pero es considerada la bacteria cariogénica por excelencia. Existen propiedades importantes del S. mutans que explican su poder cariogénico; su habitat natural es la superficie dental. S. mutans saca de la sacarosa la energía necesaria para su crecimiento y proliferación. Transforma la sacarosa para producir polisacáridos extracelulares insolubles, sustancias adhesivas que ayudan a aglutinar las bacterias y a mantenerse en la superficie dental. Transforma la sacarosa para producir, en el mismo terreno, grandes cantidades de ácidos orgánicos (capacidad acidogénica). Acumula, en período de abundancia, reservas glucídicas intracelulares de tipo glucógeno, que fermenta en período de escasez, prolongando la producción de ácidos orgánicos en la misma medida y es capaz de sobrevivir en el medio creado, extraordinariamente ácido, en el que la mayoría de las demás bacterias no A lo largo de los últimos años, múltiples trabajos de investigación han establecido de forma clara la relación entre S. mutans y caries. Estos datos Experimentalmente; el S. mutans provoca caries en animales como hamster, Se ha establecido una correlación positiva entre la presencia de S. mutans, tanto en la saliva como en la placa, y la incidencia de caries. La infección de una superficie dental por S. mutans generalemente precede a En un individuo con un alto índice carioso, las superficies infectadas por S. mutans son más numerosas que en una persona con poca caries. La inmunización de los animales de laboratorio contra S. mutans reduce la Los tratamientos antimicrobianos dirigidos contra S. mutans reduce considerablemente la incidencia de caries. Estos conocimientos nos permiten identificar a los individuos con riesgo tanto en la prevención como la erradicación, con instrumentos que se utilizan actualmente para el conteo y localización del S. mutans de muestras de saliva. Ya localizada las zonas altamente infectadas por S. mutans generalmente se correlacionan con unas manchas blanquecinas, que no es otra cosa que la desmineralización del esmalte, el cual al avanzar se convierte en lesión cariosa y si esta persiste y avanza, pueden presentarse: Necrosis pulpar, Absceso periapical, Granuloma, Quistes, Fístula Crónica, Osteomielitis y completa destrucción ó pérdida del diente y de sus funciones. Pero aquí surge una gran interrogante ¿habiendo identificado el causante principal de la caries dental y se han determinado tratamientos que erradiquen esta bacteria, porque no lo usan para disminuir la incidencia de la caries dental La respuesta podría parecer simple y no. Esta bacteria tiene como habitat natural la boca, además tendríamos que utilizar constantemente terapéuticas antibióticas, lo que a la larga perjudicarían otras partes de nuestro organismo. Pero no debemos olvidar el concepto multifactorial para definir a la caries dental. El S. mutans se ha manifestado como la principal bacteria etiológica de la caries, pero no es el único y además existen otros muchos factores dentro de la homeostasis de la boca que permite un desequilibrio tanto en la superficie del esmalte como en la saliva y sus elementos que la conforman como Después de todo lo expuesto con anterioridad, no hay duda de que Streptococus mutans es uno de los máximos responsables. En el 70 % de los casos, esta bacteria representa más del 10 % del total de la flora oral, mientras que en el 70 % de las dentaduras sanas, la bacteria está ausente. Por tanto la inhibición de los microorganismos de la placa va dirigida especialmente contra esta bacteria. En dentífricos y colutorios utilizan soluciones compuestas de glucosa, fluoruro y decanoato potásico, que han resultado bastante efectivas a mediano y largo plazo pero con efectos secundarios. La glucosa actúa como sustrato bacteriano y cuando el pH de la placa baja, el fluoruro y el decanoato unen protones, pasan al citosol bacteriano y los liberan en el interior donde el pH es mayor, contribuyendo a reducir su valor e inhibir el transporte mediado por la fuerza protonmotriz de la glucosa. El ataque es preferente contra Streptococus mutans que es muy dependiente de este tipo de transporte para Actualmente el elemento más importante en la lucha contra la caries es el flúor, esencial para la formación de apatita remineralizada, sin embargo, como se ha mencionado su efecto es de largo plazo por lo que, ante esta problemática de salud en nuestra sociedad se requieren buscar tratamientos alternativos que sin dejar de ser económicos para la población resulten de efecto más inmediato. Una vía para alcanzar este objetivo es el uso de la Homeopatía, que recientemente ha sido de enorme beneficio para la humanidad, en especial en Dentro de la Terapéutica Homeopática existen alcoholaturas o extractos de plantas, llamadas tinturas madres, capaces de crear inhibición en algunos microorganismos de la placa. En investigaciones anteriores se ha demostrado que algunas tinturas madres como Caléndula officinalis y Echinácea angustifolia tienen importantes efectos inhibitorios sobre streptococcus mitis,. . Calendula off es una planta de la familia de las compuestas y sus principios activos mas importantes son flavonoides y aceites esenciales. La Echinácea angustifolia es una planta también de la familia de las compuestas, dentro de sus principales principios activos son polisacáridos, ácido caféico, alquilamidas Isobutilamidas, poliacetilenos, y glucósidos. En este trabajo esperamos reportar el efecto de las tinturas calendula officinalis y Echinacia angusifolia, sobre el Streptococus mutans con la finalidad de contribuir con nuevas alternativas en el combate de tan importante problema de MATERIALES Y METODOS
1.- Preparación del inóculo: Inocular en un tubo con CMH una asada de la cepa. Incubar a 37°C hasta que alcance la turbiedad equivalente al tubo 0.5 del 2.- Aplicación de tres distintas diluciones (1/1, 1/3 y 1/6) de las tinturas o alcoholaturas a los cultivos de streptococcus mutans. 3.- Siembra del inóculo: Se Introdujo un hisopo estéril en el tubo con la cepa estandarizada, se exprimió el hisopo presionando en las paredes del tubo y se sembró masivamente en GS y MGScMH para posteriormente dejar secar. En la caja de GS, se sembró Streptococcus mutans y se observó si esta presentaba crecimiento bacteriano a las 24, 48 y 72 hrs; posteriormente se tomó de la caja de GS y realizó resiembra del mismo para verificar el aislamiento puro del agente patógeno. Después de haber verificado que la cepa indicada se procedió a hacer lo siguiente: a las cajas de GS se le impregnaron los medicamentos homeopáticos correspondientes y el testigo el cual fué alcohol del 90, se dejó secar a temperatura ambiente y a las 24 hrs se inoculó el agente a cada uno de los medios con medicamento homeopático, cabe mencionar, que las impregnaciones se realizaron con cada medicamento y con el control, así como con su dilución correspondiente 1:1, 1:3, 1:6. con un número para identificar que medicamento es. RESULTADOS
Los resultados que reflejan el efecto inhibitorio de las tinturas madre Tintura Caléndula off. y Echinacea a. sobre Streptococcus mutans se presentan en la Tabla 1. Efecto inhibitorio de las tinturas madre sobre Streptococcus mutans
con la técnica de impregnación
Dilución de las tinturas madre
Tinturas madre
Control positivo
+ (Menor crecimiento), ++ (Moderado crecimiento), +++ (Mayor crecimiento) ANALISIS
El uso que se le ha dado a Calendula offcinalis como medicamento es debido a que este actúa como un antiséptico homeopático, obteniendo una mejor Así en el caso de Echinacea angustifolia donde el mayor uso terapéutico de esta es en forma oral que actúa a nivel sanguíneo, en septicemia con supuración y septicopiemia. De igual manera a nivel orofaringe y cavidad bucal. Para que un estudio etnobotánico - farmacológico “in vitro” sea eficaz debe iniciar desde el potencial antibacteriano y antimicótico de los principios puros de las plantas (principios activos) o con los extractos crudos (tinturas). En ambos se utiliza una prueba para determinar la susceptibilidad antimicrobiana en las pruebas de dilución y en discos o en difusión en agar. En la actualidad en odontología no se han realizado suficientes estudios “in vitro” sobre Calendula officinalis y Echinacea angustifolia contra microorganismos de la La actividad antimicrobiana “in vitro” de Calendula officinalis y Echinacea angustifolia no se ha investigado en forma amplia. Por lo tanto se decidió evaluar su actividad antimicrobiana “in vitro”, no se realizó de forma comparativa con antibióticos porque se desconoce la molécula responsable del fenómeno de la formación del halo, por lo que no se puede saber la concentración de dicha molécula, por lo que no se puede establecer una concentración mínima inhibitoria (MIC), ni la potencia de dicha molécula. Comparando la actividad antimicrobiana de las tinturas ya mencionadas; en este estudio Echincea angustifolia, mostró una inhibición moderada en las diluciones 1:1 y 1:3 mientras que en la dilución 1: 6 mostró crecimiento alto. En el caso de la tintura de Calendula officinalis esta nos mostró mayor inhibición en el crecimiento del agente patógeno en comparación de Echincea angustifolia ya que en la dilución 1:1 y 1:3 presentó un crecimiento bajo y En este trabajo se concluye que aunque ambas tinturas presentan efecto inhibitorio en el crecimiento de streptococcus mutans la acción del medicamento de Calendula off. presentó mayor eficiencia, que Echinacea angustifolia. Además en concordancia a lo reportado en investigaciones anteriores con Streptococcus, se obtuvo mayor inhibición en las diluciones 1:1 No se descarta, aun la posibilidad de obtener cambios en el patrón de inhibición de ambos medicamentos al utilizar sensodiscos sin alcohol, con lo cual corroboraríamos si efectivamente el halo de inhibición en las cepas del Streptococcus mutans es mas favorable con Calendula officinalis que con REFERENCIAS
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